کلونینگ و توالی یابی پلاسمید کد کننده پروتئین گرانولی متراکم ۱۴ سویه rh توکسوپلاسما گوندیی

نویسندگان

احسان احمدپور

ehsan ahmadpour علوم پزشکی مازندران شهاب الدین سروی

shahabeddin sarvi علوم پزشکی مازندران احمد دریانی

ahmad daryani علوم پزشکی مازندران مهدی شریف

mehdi sharif علوم پزشکی مازندران محمد باقر هاشمی

چکیده

سابقه و هدف: بیماری توکسوپلاسموز از بیماری های شایع در جهان می باشد که حدود یک سوم مردم دارای آنتی بادی بر علیه توکسوپلاسما هستند. این بیماری بیشتر به دلیل عوارض وخیم آن، در موارد مادرزادی و نیز بیماران نقص سیستم ایمنی اهمیت دارد. ژن کد کننده پروتئین 14gra می تواند به عنوان یک هدف مناسب جهت ساخت dna (deoxyribonucleic acid) واکسن و همچنین طراحی کیت تشخیصی مورد ارزیابی قرار گیرد. هدف از این بررسی، شناسایی و کلون کردن ژن کد کننده پروتئین 14gra سویه rh توکسوپلاسما گوندیی بود. مواد و روش ها: در مرحله اول پس از جداسازی تاکی زوئیت های توکسوپلاسما از مایع صفاقی موش آلوده، dna آن استخراج شد و پس از انجام pcr (polymerase chain reaction)، محصول تکثیر شده بر روی ژل الکتروفورز بررسی گردید. سپس ژن حاصل در وکتور ptg19-t کلون گردید. جهت تأیید از روش های colony-pcr و هضم آنزیمی به وسیله آنزیم های محدود کننده hindiii و ecori استفاده شد. در نهایت ژن 14gra کلون شده در وکتور ptg19-t مورد تعیین توالی قرار گرفت. یافته ها: بررسی واکنش pcr بر روی ژل الکتروفورز و همچنین تعیین توالی ژن کد کننده پروتئین 14gra نشان داد که این ژن 1227 جفت بازی با ژن 14gra سویه rh ثبت شده در ژن بانک تشابه کامل داشت. علاوه بر این، با استفاده از روش های هضم آنزیمی و colony pcr کلون شدن، ژن 14gra در پلاسمید ptg19-t مورد تأیید قرار گرفت. استنتاج: ژن 14gra به طور موفقیت آمیزی در پلاسمید ptg19-t کلون شد و این پلاسمید می تواند برای مطالعات بعدی جهت ساخت واکسن dna و طراحی کیت تشخیصی مورد استفاده قرار گیرد.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

کلونینگ و توالی‌یابی پلاسمید کد کننده پروتئین گرانولی متراکم 14 سویه RH توکسوپلاسما گوندیی

Background and purpose: Toxoplasmosis is a common parasitic disease throughout the world and ‎one-third of the population has antibodies to Toxoplasma gondii. This disease causes serious medical ‎problems in fetuses and immunocompromised individuals. As gene encoding protein GRA14 can be ‎considered as a suitable target for DNA vaccine and designing diagnostic kits the aim of this study was to ...

متن کامل

کلونینگ و توالی یابی پلاسمید کد کننده پروتئین میکرونم 3 (MIC3) توکسوپلاسما گوندی

 سابقه و هدف: توکسوپلاسما گوندی، انگل تک‌یاخته درون سلولی اجباری و عامل توکسوپلاسموزیس در انسان و حیوانات بوده که در سراسر جهان انتشار دارد. پروتئین میکرونم 3 (MIC3) با وزن ملکولی 90 کیلو دالتون، عامل چسبیدن انگل به سلولهای میزبان در آغاز تهاجم است و در تمام مراحل تکاملی از انگل ترشح شده و یک آنتی ژن قوی محسوب می شود؛ از این نظر علاوه بر ایمونوژن بودن و کاندید ساخت واکسن، در تشخیص نیز کاربرد دا...

متن کامل

کلونینگ و بیان ژن کد کننده راپتری سیزده (ROP13) سویه RH توکسوپلاسما گوندیی

Background and purpose: Toxoplasma gondii (T. gondii) is an obligatory intracellular protozoan parasite. Toxoplasmosis is highly prevalent and has a great effect on public health, therefor, there is a need for vaccine and sensitive diagnostic procedures. This study aimed at cloning and investigating the expression of ROP13 gene of T. gondii. Materials and methods: In this study, the gene was c...

متن کامل

کلونینگ ژن GRA5 توکسوپلاسما گوند‌ای سویه RH در پلاسمید یوکاریوت

مقدمه: توکسوپلاسموز یکی از بیماری‌ های زئونوز و دارای انتشار وسیع در جهان بوده که اثرات شدید بـالینی و دام پزشکی عدیده ای را ایجاد می‌کند. این انگل داخل سلولی باعث عوارض عصبی و بیماری ‌های چشمی در افراد دارای ضعف ایمنی و نوزادان متولد از مادران آلوده می شود. بروز موارد زیاد بیماری همراه با عوارض شدید و کشنده توکسوپلاسموز ضرورت یافتن واکسن مؤثری برای این بیماری را نشان می دهد. یکی از مهم ‌ترین ر...

متن کامل

کلونینگ و توالی یابی پلاسمید کد کننده پروتئین میکرونم ۳ (mic۳) توکسوپلاسما گوندی

سابقه و هدف: توکسوپلاسما گوندی، انگل تک یاخته درون سلولی اجباری و عامل توکسوپلاسموزیس در انسان و حیوانات بوده که در سراسر جهان انتشار دارد. پروتئین میکرونم 3 (mic3) با وزن ملکولی 90 کیلو دالتون، عامل چسبیدن انگل به سلولهای میزبان در آغاز تهاجم است و در تمام مراحل تکاملی از انگل ترشح شده و یک آنتی ژن قوی محسوب می شود؛ از این نظر علاوه بر ایمونوژن بودن و کاندید ساخت واکسن، در تشخیص نیز کاربرد دار...

متن کامل

کلونینگ و شناسایی ژنGRA4 توکسوپلاسما گونده‌ای سویه RH در پلاسمید یوکاریوت بیانی pcDNA3

  Background and Objective: Toxoplasmosis, caused by an intracellular protozoan parasite, Toxoplasma gondii, is widespread throughout the world. Being a cause of congenital disease and abortion in humans and in domestic animals, the disease is of major medical and veterinary importance. In addition, it has increased importance due to toxoplasma encephalitis in AIDS patients. Therefore, developi...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
مجله دانشگاه علوم پزشکی مازندران

جلد ۲۴، شماره ۱۱۲، صفحات ۴۲-۴۹

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023